1,、定標(biāo)的意義
定標(biāo)就是要找出一個參考點,就是一個K值(或F值),。它是由儀器和試劑狀態(tài)確定下來的,。當(dāng)我們測定一個標(biāo)本時,無論你是用手工的方法或全自動生化分析儀,,測出來的值只是一個吸光度,,這個吸光度對我們沒有什么意義,我們要把這個吸光度轉(zhuǎn)換成一個濃度或酶的活性,。那就要乘上一個K值,,計算并打印出來的結(jié)果對我們就有意義了。K值就是我們通過定標(biāo)找出來的,。一般上最低要求是有試劑空白與標(biāo)準(zhǔn)品,,經(jīng)過儀器測定出兩個吸光度:
K=(標(biāo)準(zhǔn)濃度-試劑空白)/(A標(biāo)準(zhǔn)-A試劑空白)
(試劑空白通常為0)
標(biāo)準(zhǔn)液的濃度我們是知道的,這兩個吸光度可以由儀器測出,,這樣就得出了一個K值,。無論什么樣的標(biāo)本,用其吸光度乘以K值我們就得到的答案,。因此K值具有非常決定性的意義,,可以決定標(biāo)本的準(zhǔn)確性。
2,、K值的決定因素
我們看看K值會受到什么影響呢,?第一,標(biāo)準(zhǔn)液的濃度一定要準(zhǔn)確(標(biāo)準(zhǔn)液最好與標(biāo)本一樣用血清為基質(zhì)的)第二,,標(biāo)準(zhǔn)液的的吸光度與試劑空白的吸光度一定要準(zhǔn)確,。吸光度受儀器狀況、試劑狀況的影響,。如果你的儀器相當(dāng)穩(wěn)定,,試劑是影響K值的一個主要因素。
3,、如何確定K值是正確的,?
我們一般用質(zhì)控血清來檢查,最好是兩種水平的質(zhì)控血清來檢查,。如果質(zhì)控結(jié)果很好,,可以說K值是準(zhǔn)確的,。用這個K值計算出來病人的結(jié)果也是準(zhǔn)確的,所以K值非常關(guān)鍵,。
4、K值的真面目
K值實際上代表了斜率,,截距代表了試劑空白,,試劑空白每天都在變化,所以K值的穩(wěn)定性決定您的儀器與試劑,,如果儀器與試劑都很穩(wěn)定,,那K值也很穩(wěn)定。
5,、多長時間定一次標(biāo)合適,?
這要看您試劑的穩(wěn)定性,質(zhì)控結(jié)果不好,,有些項目做試劑空白可以解決,,有些項目需要做兩點定標(biāo)。
6,、是否每天定標(biāo)就能保證結(jié)果穩(wěn)定,?
不一定,可能您在定標(biāo)時并不是每天都新溶解定標(biāo)液,,因為定標(biāo)液復(fù)溶后有一些項目不穩(wěn)定,,比如:TBIL、DBIL(見光分解),、GLU(細(xì)菌分解),、酶項目(冰凍后復(fù)溶降解)。解決方法:以上項目在定標(biāo)時一定要新溶解一瓶定標(biāo)液,,至少溶解30分鐘,,在1小時內(nèi)測定完成。